[摘要]目的：探讨芦荟多糖（aloe polysaccharide, AP）对兔脊髓缺血损伤是否有神经保护作用。方法：32只成年雄性新西兰兔随机分成4组(每组8只 )，即对照组（C 组）、芦荟多糖组（A组）、溶剂对照组( V组 ) 及假手术组(S组)。A组在脊髓缺血前30min经耳缘静脉给予50m・kg-1芦荟多糖；V组以同样方式给予等容量生理盐水；C组仅仅制备脊髓缺血损伤模型，不进行其它处理；S组仅仅暴露腹主动脉，而不阻断它, 其他处理同C组；兔脊髓缺血模型采用夹闭兔腹主动脉肾下段20min。再灌注后48h, 对所有动物神经功能评分， 然后处死动物取脊髓（L5-7），制作标本行组织病理学观察。结果：A组的神经功能评分和脊髓前角正常神经细胞数明显多于C组及V组(P0.05)；神经功能评分与其对应脊髓前角正常神经细胞计数之间有显著相关性（r=0.804，P0.05).There was a stong correlation between the neurologic function scores and the number of normal neurons in anterior horn of spinal cord（r= 0.804, P 1.2 实验动物分组：32只成年雄性新西兰大白兔，体重2～2.5kg，随机分成4组(n=8)：即对照组（C组）、芦荟多糖组（A组）、溶剂对照组( V组 ) 及假手术组(S组)。A组在脊髓缺血前30min经耳缘静脉给予50m・kg-1芦荟多糖；V组以同样方式给予等容量生理盐水；C组仅仅制备脊髓缺血损伤模型，不进行其它处理；S组仅仅暴露腹主动脉，而不阻断它，其它处理同C组。
1.3 动物模型制作：所有动物术前禁食过夜，自由饮水。参照文献[4]的方法制作兔脊髓缺血模型。即静脉注射30mg・kg-1戊巴比妥钠麻醉动物后，经面罩吸入4L・min-1氧气，分别经耳动脉及股动脉置管以监测近端动脉压及远端动脉压；普鲁卡因局麻开腹，暴露腹主动脉左肾动脉分支下段；于左肾动脉分支点以下1.0cm处，放一环扎装置，用于阻断腹主动脉血流造成脊髓缺血。缺血前经耳缘静脉给予400U肝素。扎闭腹主动脉20min后去除环扎装置，恢复血流灌注。检查血管无损伤后关腹。术中持续监测心率、动脉血压及直肠温度。用烤灯维持动物体温37.5℃～38.5℃。分别于扎闭前即刻、扎闭后10min和再灌注后20min经兔耳动脉采血监测PaO2、PaCO2及血糖。
1.4 神经功能评分：在缺血再灌注后48h由一不了解分组情况的观察者对动物后肢运动神经功能评分。评分参照Tarlov[5]标准，分为五级：O分,后肢完全瘫痪；1分，后肢有微弱运动；2分，后肢可运动，但无法站立或跳跃；3分，可站立或跳跃，但有明显共济失调；4分，后肢运动功能完全恢复。
1.5 组织病理学观察：神经功能评分完毕后，用戊巴比妥钠30mg・kg-1麻醉动物后，以40g・L-1多聚甲醛经心灌注固定脊髓组织，取腰段脊髓组织（L5-L7），行石腊包埋后切片（6μm厚），HE染色，光镜下（400×）由一不了解分组情况的观察者观察脊髓病理学改变并对脊髓前角正常运动神经元计数。损伤及坏死神经元表现为胞核固缩或溶解，胞质呈嗜伊红染色，胞质中尼氏体消失；正常神经元表现为多角形结构，胞核结构清晰，胞质中尼氏体存在。病理损伤程度通过计数脊髓前角 (沿中央导水管横线以前 )正常神经元数来评估。每只动物脊髓前角正常神经元计数为 3张切片计数的均数。
1.6 统计处理：所有生理学参数以均数±标准差（x±s）表示，组间比较采用随机单位组方差分析；神经功能评分和脊髓前角正常神经细胞计数各组间比较采用非参数的秩和检验（Kruskal-Wallis test）, 然后用 Mann-whitney U检验进行比较，显著性水准需用比较次数校正。神经功能评分及脊髓前角正常神经元数之间的相关性分析采用Spearman等级相关分析。
2 结果
2.1 生理学参数：各生理学参数各时间点组间无明显差异 (P>0.05, 表1)。
2.2 神经功能评分：A组的神经功能评分明显高于C组及V组(P0.05), (图1)。
2.3 组织病理学观察：A组的脊髓前角正常神经细胞数明显高于C组及V组(P0.05)(图2)。C组及V组几乎未见到前角运动神经细胞，脊髓损伤严重，有大量的空泡变性；A组可观察到形态基本正常的前角运动神经细胞，结构完整，核仁清晰，可见尼氏体；S组为形态正常的前角运动神经细胞（图3）。
2.4 神经功能评分与脊髓前角正常神经细胞数之间的相关性：分析再灌注48h后神经功能评分与其对应脊髓前角正常神经细胞计数之间的关系，发现两者之间有显著的相关性（r=0.804，P [4]Wang Q,Ding Q,Zhou Y,et al.Ethyl pyruvate attenuates spinal cord ischemic injury with a wide therapeutic window through inhibiting high-mobility group box 1 release in rabbits[J].Anesthesiology,2009,110(6):1279-1286.
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[收稿日期]2011-11-22 [修回日期]2012-02-01
编辑/张惠娟