杨 慧
(江苏联合职业技术学院 徐州医药分院，江苏 徐州 221116)
小柴胡颗粒具有解表散热、疏肝和胃的功效，在生产的过程中，对指标性成分具有较高的要求，需要做好5种指标性成本的分析，包括：黄芩苷、黄芩素、汉黄芩苷、汉黄芩素和甘草次酸。为了确保小柴胡颗粒指标性成分含量足够，提高化工生产质量，需要对指标性成分含量进行同时测定。对小柴胡颗粒的质量进行全面评价，确保小柴胡颗粒能够在生产后有效投入使用，保障小柴胡颗粒具有充分的含量测定信息。
戴安高效液相色谱仪、电子天平、超声波清洗器。黄芩苷、黄芩素、汉黄芩苷、汉黄芩素和甘草次酸，纯度不低于95%。将其作为对照组使用，保证测定过程具有良好的对比条件，便于对试验过程进行灵活安排。需要注意的是，试验仪器使用前需要做好校正工作，确保仪器能够正常工作，并规范化地进行使用，防止仪器在测定过程中产生误差，对含量测定过程造成影响。小柴胡颗粒需要选择不同的批次，对不同批次的颗粒进行分析，确定5种指标性成分组成，保障小柴胡颗粒能够得到全面地检验。
2.1 色谱条件
色谱条件是实现成分测定的关键。色谱条件包括色谱柱、流动相、检测波长、进样量等，需要根据小柴胡颗粒的成分展开分析，提高色谱结果的准确性，避免测定结果受到影响。色谱柱会受到不同成分含量的影响，需要合理对色谱柱进行选择，否则将会影响到色谱柱的正常使用，甚至会导致使用寿命下降。本试验中，色谱柱的规格为：250 mm×φ4.6 mm，5 μm，能够对色谱柱起到保护作用，使色谱条件能够发挥作用。流速相主要受到进样量的影响，需要对流速相的设定进行重视，确保库流速与进样量相匹配。通常情况下，流速一般设置为 1.0 mL/min，并且不可随意进行改动。检测波长受到活性成分响应时间的影响，需要精准地对波长进行选择，使色谱检测能够满足精度要求，本试验检测波长为 254 nm。另外，还需要对进样量进行控制，将进样量控制在10～15 μL 之间，保证色谱能够易于进行检测[1]。
2.2 试液配置
2.2.1 对照溶液配制
对照溶液在指标性成分分析中具有重要作用，需要做好对照溶液的配置工作，使对照溶液能够发挥作用，为成分测定过程提供对比条件，保障对照溶液配置的合理性。对照溶液配置需要进行精密称取，使溶液具有良好的配置指标，防止试验对比过程受到影响。本试验中，取黄芩苷 14.86 mg、黄芩素 9.51 mg、汉黄芩苷 8.36 mg、汉黄芩素 9.26 mg，甘草次酸 7.93 mg。采用甲醇溶液分别进行稀释，注入量为 10 mL，最终得到稀释质量浓度分别1.49、0.95、0.84、0.93、0.79 mg/mL。甲醇对小柴胡颗粒5种指标性成分具有较高的溶解性，将其作为稀释溶剂具有显著优势，可以将有效成分进行充分溶解，保障对照溶液能够进行进一步的稀释，确保含量测定过程能够顺利进行。
2.2.2 试验溶液配制
小柴胡颗粒称取之前，需要认真做好研磨工作，将其研磨成细粉状，加速颗粒的溶解速度。取研磨后粉末 1.5 g，将其置于 200 mL 的锥形瓶中，采用乙醇溶液进行稀释操作，向锥形瓶中加入 50 mL 的乙醇溶液。为了促进指标性成分的进一步溶解，应采用超声振荡提取的方式，促进指标性成分向乙醇中进一步渗透，加速小柴胡颗粒进一步溶解，使有效成分能够充分地溶解。超声振荡时间为 0.5 h，冷却状态，随后再进行称量。若溶液出现失重状态，则采用同浓度的乙醇溶液进行补足，保障溶液可以更好地投入使用。
2.3 适应性试验
为了确保成分测定结果的准确性，需要进行适应性试验，确保试验系统能够进行准确地测定，使试验仪器能够更好地投入使用。适应性试验需要应用对照组溶液，严格做好质量浓度测定工作，确保测定质量浓度处于精度范围内，进而实现良好的测定效果。适应性测定过程中，需要注重色谱图的使用，对5种指标性成分进行记录，实现规范化的测定效果，保障试验过程符合适应性要求。试验过程中，需要注重相邻色谱峰的分离度，确保分离度大于均1.5，使各个分度具有明显的色谱峰，便于对检测结果进行识别，采用规范化测定方法。同时，需要对色谱的保留时间进行关注，使色谱能够更好地投入适用，对色谱之间的边界进行初步预估，保障适应性检验过程的有效性[2]。
2.4 线性关系试验
线性关系是实现进样量分析的关键，需要做好线性关系分析试验，确定线性关系的大致范围，提高线性关系分析的合理性。线性关系分析具有一定的难度，需要通过对照组进行判断，对进样量实施严格的控制，防止进样量控制过程中发生问题，确保进样量控制的精准化程度。线性关系试验需要进行精密取样，将样本投入到液相色谱仪中，对5种指标性成分的进样量进行检测，对各项指标的测量情况进行确定，将峰面积S与进样量m(μg)作为主要参数，进而得到指标性成分的曲线方程。
黄芩苷：S=53.974m+0.0598，r=0.9988；
汉黄芩苷：S=142.98m+0.5122，r=0.9997；
黄芩素：S=185.68m+0.5374，r=0.9996；
汉黄芩素：S=207.12m+0.1026，r=0.9995；
甘草次酸：S=104.28m+0.2124，r=0.9989。
结果表明，小柴胡颗粒5种指标性成分的进样量控制如下：黄芩苷0.43～4.52 μg，汉黄芩苷0.15～2.54 μg，黄芩素0.24～2.45 μg，汉黄芩素0.26～2.36 μg，甘草次酸0.14～2.28 μg。
2.5 加样回收试验
通过加样回收试验，可以对小柴胡颗粒指标性成分的回收率进行测量，保障样品具有可回收的状态。试验过程中，需要将小胡柴颗粒分成5份，每份质量为 0.5 g，再向其中精密添加样品试剂。最终得到5种指标性成分的溶液质量浓度如下：黄芩苷 0.210 mg/mL、黄芩素 0.102 mg/mL、汉黄芩苷 0.165 mg/mL、汉黄芩素 0.114 mg/mL、甘草次酸 0.145 mg/mL。对上述溶液进行色谱条件测定，同时计算对应的回收率。通过对测定结果进行分析，得到的5种指标性成分的回收率分别为97.25%、98.26%、99.01%、98.89%、97.95%。由此可见，加样回收试验具有较高的回收率，能够确保有效成分回收的稳定性，保障5种指标性成分能够在溶液中进行提取，使有效成分回收具有精密性。
2.6 样品测定
样品测定是小柴胡颗粒指标性成分分析的关键，需要围绕对照溶液和试验溶液进行，使样品测定过程能够形成对照，提高样品检测的精准性。分别取 15 μL 对照溶液和试验溶液进行试验，对5种指标性成分的含量进行对照检测，使含量测定结果能够得到验证。分别按照黄芩苷、黄芩素、汉黄芩苷、汉黄芩素和甘草次酸的顺序进行测量，得到的对照组质量分数为：0.56%、0.94%、1.16%、0.91%、0.75%；
试验组质量分数分别为：0.54%、0.95%、1.15%、0.89%、0.72%。通过对照组与试验组对比可知，两者的含量测定结果具有较高的一致性，说明样品测定方法满足标准规定，样品测定结果具有较高的准确性，可以将上述数据作为5种指标性成分含量的测量结果[4]。
2.7 特征图谱分析
特征图谱是分析小柴胡颗粒指标性成分的重要方法，需要做好图谱的分析工作，对特征图谱展开细致化地分析，保证图谱能够得到有效运用。图谱分析过程中，需要对参照峰进行选取，将黄芩苷作为参照峰，对小柴胡颗粒的特征峰展开分析，使特征图谱的变化能够形成鲜明的对比。图谱分析需要进行相似度检测，确保图谱之间的相似度是否一致。对5批样品进行分析发现，图谱的相似度分别为0.985、0.936、0.954、0.933、0.914。图谱之间具有较高的相似度，说明图谱测量结果具有较高的精准。在特征图谱条件下，需要考量小胡柴颗粒5种指标性成分含量测定的重复性、稳定性、精密性等，对特征图谱进行全面分析，保障指标性含量测定过程能够有序开展。实际测量过程中，相对峰面积RSD应小于3.0%，使特征图谱能够得到测定标准，保障指标性成分评价的合理性。
本文方法对小柴胡颗粒进行指标性成分进行分析能够为化工生产过程提供参考。小柴胡颗粒含量测定需要满足一定的标准，确保各项成分的含量测定能够达到指标，对指标性成分含量作出客观的评价，保障含量测定过程能够顺利进行。
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