何子顺，贾艺凡，李贵美
（1聊城市农业科学院，山东 聊城 252000；
2江苏省农业科学院植物保护研究所，南京 210000）
梨胴枯病又称干枯病，是梨枝干的重要病害之一，与梨树枝干上发生的干腐病症状相近，主要为害砂梨系统和白梨系统的品种。以为害枝干为主，发病严重时病斑能延伸至整个枝干，造成树皮坏死、枝干死亡，树势衰弱，甚至整株死亡，给生产造成很大损失。该病最早发现于日本梨区，主要表现在砂梨上[1]，随着引种传入我国。我国梨产区发生普遍，云南、浙江、江苏、辽宁、吉林、黑龙江等省都有分布[2]。2000年以后，我国多个梨产区相继发现该病，并引起生产者的重视。当前聊城梨产区尚未见该病报道。笔者先后在聊城的茌平、东阿、高唐和冠县发现疑似胴枯病症状，经鉴定确定为是。为准确鉴别该病、做好防控，综合前人研究的结果，提出鉴别方法和防控措施。
1.1 病原材料
病原材料样品取自山东省高唐县三十里铺镇后辛村 梨 园，园 面 积4.70 hm2，树 龄8年，感 病 株 率51.20%。样品为1年生发病梨树枝条，于2021年12月21日从病株剪下，共50条，及时通过快递发往江苏省农业科学院植物保护研究所，进行病原菌鉴定。
1.2 病原菌分离
采用组织分离法。用已灭菌的手术刀在病健交界处切取少量组织；
对所取的组织用75%酒精消毒，再用灭菌水洗2次；
将消毒后的组织置于新鲜的PDA平板上，25℃培养2 d；
待长出真菌，从边缘打孔，将菌丝块移植到新的PDA培养基上，25℃培养3d。
1.3 病原菌鉴定
分离纯化后，分离病原物的鉴定采用分子鉴定方法。采用扩增其内部转录间隔区(ITS)序列，在测序后进行BLAST分析。
PCR扩增。选用20 μL体系，包括dd H2O 8.5 μL，Mix 10 μL，上游引物0.5 μL，下游引物0.5 μL，模板0.5 μL。PCR扩增程序为:94℃预变性5 min，94℃变性30 s，53℃褪火30 s，72℃延伸40 s，30个循环，最后72℃延伸10 min。
扩增产物用1%琼脂糖凝胶，TBE为缓冲液，140 mv，上样5μL电泳检测。电泳条带亮，大小在750 bp。
将PCR扩增产物送到擎科公司测序，将得到的序列在NCBI上进行Blastn比对。
1.4 鉴定结果
枝干病害样品分离得到5株真菌:球黑孢菌(Nigrospora sphaerica)、间座壳属(Diaporthesp.)、芸薹生 链 格 孢(Alternaria brassicicola)、 密 实 链 格 孢(Alternaria compacta)、链格孢(Alternariasp.)，最终确定该病为梨胴枯病。通常认为，梨胴枯病致病真菌是福士拟茎点霉(Phomopsis fukushiiTanaka et Endo)，属半知菌亚门球壳孢目拟茎点菌属真菌，有性态属于间座壳属(Diaporthe)。但郭雅双研究指出，我国梨产区梨胴枯病的病原菌种类具有多样性，共检测到19种，其中榆树间座壳菌(Diaporthe eres)引起的梨胴枯病分布广[1](图1)。
图1 病枝上检测鉴定病源菌
2.1 为害情况
该病在我国发现于20世纪80年代，发病范围广，但没有引起足够的重视。1988年吉林省延吉梨树胴枯病发病株率达16.9%[3]；
1997年浙江桐庐的‘黄花’‘新世纪’梨发病株率5%~10%，重者发病株率达20%[4]；
2008年河北省泊头重点产梨乡镇发病株率平均为13.6%[5]；
2011年以来梨胴枯病严重影响了甘肃武威梨产业的发展[6]；
2013年在江西赣东的梨园病株率达到2%~5%[7]。2021年，笔者在聊城的茌平、东阿、高唐和冠县发现，梨胴枯病的感病品种以‘秋月’为主。对发生该病的县(区)各调查1个果园。由表1看出，高唐县后辛村8年生树发病株率51.20%，冠县韩路村1年生树发病株率32.00%，东阿县北崔村2年生树发病株率15.00%，茌平区耿店村3年生树发病株率12.00%。由此可见，该病在我国梨产区呈现蔓延态势。
表1 梨胴枯病发病情况调查
2.2 发病症状
梨胴枯病为害部位，多数文献显示的是枝条，且以一二年生枝为主。1988年Uecker[8]研究指出，梨胴枯病菌可以导致‘丰水’梨的芽死亡。在聊城，梨胴枯病明显的特征是为害花芽和一二年生枝，受害花芽不能正常开花，甚至死亡；
受害枝形成病斑，枝势削弱，甚至枯死。受害花芽外观症状是休眠期芽的鳞片散开，受害较轻时，花芽鳞片干死，内部花原基存活，但不能正常开花；
受害重时，入冬后至花芽萌动期用手轻轻一触，花芽就脱落，严重影响梨树产量和质量。受害枝的表面起初形成圆形病斑，随后慢慢扩大成椭圆形、方形等，病斑呈褐色或红褐色，最后病部下陷，病健部交界处出现裂缝，有的树皮卷翘；
当病斑继续扩展，病部超过枝条周长1/2时，病部以上的部分就会枯死，遇大风易在病部折断。
2.3 传播源分析
通常认为，梨胴枯病近距离传播是靠风雨，远距离传播是靠苗木或种条调运。在笔者调查的4个梨园中，冠县梨园的梨苗来源于调查的高唐梨园，可以认为，冠县梨园的病源来源于高唐的梨园。茌平梨园和高唐梨园的苗木都来源于河北省衡水市深州，东阿梨园的梨苗木来源于河北省衡水市安平。由此推断，河北衡水生产的‘秋月’梨苗木存有梨胴枯病的风险较高。
2.4 同梨干腐病症状的比较
梨胴枯病和梨干腐病为害梨枝的症状相似，准确区别两种病害是做好防控的前提。二者之间的共同特点是病部褐色、坏死、凹陷、有龟裂，表面有黑色小粒点。不同点:梨胴枯病以一二年生枝为主，且扩展慢，梨干腐病以多年生枝为主，且扩展快；
梨胴枯病病斑多呈椭圆形或方形，褐色至红褐色，病皮常卷起，梨干腐病的病斑多呈梭形，褐色至黑褐色，病皮不卷起；
梨胴枯病涌出的丝状物颜色为白色，而干腐病的丝状物颜色为淡黄色(图2)。
图2 梨胴枯病和梨干腐病为害枝的症状
3.1 侵染循环
梨胴枯病以菌丝体及分生孢子器在被害枝皮内越冬。次年春季气温适合时，病菌在遇雨水后涌出分生孢子，引起初次侵染，主要从伤口或新芽侵入，借风雨进行短距离传播，靠苗木或种条调运实现远距离传播。病组织内的菌丝体在适宜条件下不断扩展，形成危害。
3.2 发病条件
气温 春天气温达15℃时病菌开始萌发，5月上中旬开始扩展，6月病斑扩展加快。在一年中有春秋两个快速扩展期，夏季温度高时病斑扩展减缓。该病扩展快慢、出现的季节，在我国不同梨产区有差异。黄窈军等[4]指出，在浙江省桐庐病斑于3―4月扩展最快，4―5月逐渐停止扩展。王焕英等[5]指出，在河北省泊头病斑于5―6月扩展较快，当年秋季即可形成大型病灶斑块。黄冬华等[7]指出，在江西省赣东病斑于3月下旬开始扩展，4―5月扩展最快。在武威发病时期为6―8月。何彩等[10]研究指出，梨胴枯病菌在PDA培养基中表现为:在5℃和40℃条件下菌落不生长，在10℃和35℃下生长速度很慢，适宜生长的温度是25~28℃。高温高湿有利于发病。
栽培条件 病菌有潜伏侵染特性，发病程度与树势密切相关，树势弱发病重；
土壤瘠薄、肥水供应不合理、化肥施入不均衡、负载过量的梨园发病重；
修剪过重、伤口过多的梨树发病重。赵成范等[3]指出，树体是否发病与幼树主干冻害密切相关。
品种 在日本梨中，‘幸水’易感病，‘丰水’‘新水’次之，‘长十郎’‘二十世纪’等较抗病[11]。在我国不同梨产区的不同品种发病轻重也有差异。赵成范等[3]指出，吉林省延吉主要发生在‘苹果梨’上；
黄窈军等[4]指出，在浙江省桐庐‘黄花’梨比‘新世纪’梨发病重；
黄冬华等[7]指出，在江西省赣东‘翠玉’‘初夏绿’‘翠冠’发病重，‘黄花’‘清香’‘晚秀’发病轻或不发病。
4.1 做好检疫
在进行苗木和种条调运时须经过严格检验，发现带病苗木和种条禁止运出，并及时销毁。
4.2 加强梨园管理
施肥应做到氮、磷、钾肥比例适当。增加有机肥施入量，以动物粪便作有机肥时要经过腐熟。加强土壤水分管理，避免发生旱、涝灾害。适时疏花疏果，达到合理负载。结合冬季修剪剪除病枝，并及时带出园外销毁。冬季修剪造成的大伤口(直径在2cm以上)要及时涂抹杀菌剂。
4.3 化学药剂防控
萌芽前用药 萌芽前7~10 d树上喷施5°Be石硫合剂1次，枝干全喷。仔细查找病斑，用刀在病斑处划道，深达木质部，然后涂药，可选腐殖酸铜原液、9281药剂5倍液或5°Be石硫合剂。
生长期用药 幼果套袋前、麦收前和采果后树上各喷1次杀菌剂，枝叶全喷，注意交替用药。可选择50%多菌灵可湿性粉剂、70%甲基托布津可湿性粉剂、75%百菌清可湿性粉剂、80%代森锰锌可湿性粉剂，一般使用浓度是700~800倍液。40%苯醚甲环唑悬浮剂3 000~4 000倍、430 g/L戊唑醇悬浮剂3 000~4 000倍、40%氟硅唑乳油8000~10000倍液。
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