摘 要 在pH=3的三氯乙酸酸性介质中，菲林B可以定量地将还原型维生素C氧化成脱氢型维生素C，利用脱氢型维生素C在920 nm处有最大吸光度，测定其含量，建立了一种测定维生素Ca，并研究了影响反应的各种因素。该方法对维生素C的检出限为0.17 mg/L；线性范围为0.5 mg/L～10 mg/L，对水果中维生素C含量测定的RSD＜2.31%；回收率为99.7%～101.1%。
关键词 菲林B；近红外分光光度法；维生素C；pH=3；测量波长920 nm；吸光度
中图分类号 O657.33 文献标识码 A 文章编号 1673-9671-(2012)021-0202-01
维生素C（抗坏血酸）广泛存在于各种食品、药物之中，特别是水果、蔬菜中含量丰富，是一种可以为人体细胞提供抗氧化作用的还原剂。维生素C主要作用是维持血管弹性，增强毛细血管抵抗力，降低其脆性与通透性，并促进其细胞增生和防止血细胞凝集。测定各种食品及药物中维生素C的含量，对于食品、药品的开发和检验具有重要意义。维生素C的测定方法主要有二氯靛酚滴定法、二硝基苯肼分光光度法、荧光分光光度法、碘量电位滴定法、钼蓝比色法及褪色光度法等。二氯靛酚滴定法、二硝基苯肼分光光度法操作复杂，测试条件较为严格。二硝基苯肼分光光度法完成一次样品分析需数小时，不能快速测定。本研究建立了一种测定水果中维生素C的菲林B（Folin B）近红外分光光度法，该方法方便、快速，操作简单，灵敏度高。测试条件允许范围较宽，抗干扰能力强，无须对样品进行特别处理，可用于测定微量的维生素C。经样品测定，结果令人满意。
1 实验部分
1.1 仪器与试剂
WCH-30A型双光束红外分光光度计（天津市港东科技公司）。
维生素C标准溶液（北京鼎国生物技术公司，Sigma公司进口分装）（50 mg/L）。
1.2 实验方法
取两支10 mL具塞比色管，其中一支加入适量的维生素C，另一支不加；然后分别依次加入2 mL的Folin B试剂，用pH=3的三氯乙酸溶液稀释至刻度，摇匀，反应5 min后，以试剂空白为参比，使用1 cm玻璃吸收池在920 nm波长处测定吸光度A值。平行测量3次，取平均值。
2 结果与讨论
2.1 最大吸收峰的选择
吸取2 mL的维生素C标准溶液，按实验方法反应后，以试剂空白为参比，在750 nm～1100 nm波长范围内扫描吸收光谱，在920 nm处有最大吸收峰，因此，本实验选择920 nm处为测量波长。
2.2 Folin B试剂用量的影响
吸取0.2、0.5、1.0、1.5、2.0和2.5 mL的Folin B试剂，分别加入维生素C标液2mL，按实验方法测定吸光度A。随着Folin B试剂用量的不断增加，吸光度A增大，在2 mL时达到最大值；Folin B用量介于1.5 mL～2.5 mL时，吸光度A较大且稳定，说明Folin B试剂用量过少时反应不完全，当维生素C浓度小于50 mg/L， Folin B试剂用量为2 mL。
2.3 酸性介质的影响
吸取2 mL维生素C标准溶液，选择三氯乙酸体系作为反应的酸性介质。改变酸度，在不同的pH条件下，按实验方法测定吸光度A。三氯乙酸介质在pH=1～5的范围内，吸光度较稳定，说明在此范围内Folin B与还原型维生素C的反应生成较稳定的脱氢型维生素C。因此本实验选择pH=3的三氯乙酸为酸性介质。
2.4 干扰实验
在上述实验选定的条件下，考察了水果中较高含量的组分对维生素C测定的干扰情况。取5mg维生素C，分别加入6 000倍量的葡萄糖、5 000倍的蔗糖、1 400倍量的CaCl2、1 000倍量的MgSO4、1 600倍量的KCl、3 000倍量的NaCl、0.16倍量的维生素B等物质，结果表明：相对误差控制在±5%以内，这些物质均不干扰测定。
2.5 样品中维生素C含量测定及回收率实验
准确称取一定质量的样品于高速匀浆机中，立即加入一定体积的pH=3的三氯乙酸溶液，捣成匀浆后，转移至100 mL容量瓶中，并定容至刻度，摇匀，过滤，弃去初滤液，然后吸取滤液2.0Ml按实验方法操作，求得样品中维生素C的实验含量，同时进行精密度实验和回收率实验。
3 结论
标准加入回收实验结果满意，回收率为99.7%～101.1%；相对标准偏差均小于2.31%。本方法的精密度和准确度较高，用于水果中维生素C含量的测定，快速、准确，结果令人满意。
参考文献
[1]国家技术临督局.中华人民共和国国家标准1986GB 6195286.
[2]赵惠莲.河北化.1996.
[3]李军.食品科.2000.
[4]孙德坤,许明月,吴定.食品工业科.2003.
[5]奚长生.光谱学与光谱分.2001.
[6]许卉,贺萍.分析化.1999.