[摘要]目的：研究雌激素受体亚型α和β(ERα和ERβ)在肥大乳房乳腺组织中和正常体积乳房乳腺组织中的表达，探讨其在乳房肥大发病机制中的作用和意义。方法：采用免疫组织化学EnVision二步法，测定38例肥大乳房和17例正常体积乳房中ERα和ERβ的表达情况。结果：ERα在肥大乳房和正常体积乳房中的阳性表达率分别为97.37%和76.47%，两者比较差异具有统计学意义（P0.05）。结论：乳房肥大的发生可能与乳腺组织中ERα含量升高有关，与ERβ无明显相关性。
[关键词]雌激素受体α；雌激素受体β；乳房肥大
[中图分类号]R730 [文献标识码]A [文章编号]1008-6455（2012）03-0431-03
Expression of estrogen receptor isoforms in the mammary gland of the hypertrophic breast and its significance
ZHANG Rui-rui1,JIN Jun-hua1,SUN Jia-ming2
(1.Department of Plastic Surgery,The Central Hospital of Xiangyang,Xiangyang 441021,Hubei,China 2. Department of Plastic Surgery,Union Uospital,Tongji Medical College,Huazhong University of Science and Technology)
Abstract： Objective To detect the expression of the estrogen receptor(ER) isoforms(ERα and ERβ)in the mammary gland of the hypertrophic breast and the normal voluminal breast,so that their function and significance in the pathogenesis of breast hypertrophy can be investigated. Methods The breast tissue samples were obtained,including hypertrophic breast tissue(38 cases) and normal voluminal breast tissue(17 cases).They were detected by the EnVision two step method immunohistochemistry for the expression of ERα and ERβ. Results The positive expression rate of ERα in the hypertrophic breast was 97.37%,while 76.47% in the normal voluminal breast,showing a significant difference between the two groups（P0.05）. Conclusions The development of hypertrophic breast may be related to the excessive expression of ERα in the breast tissue,while the relationship between the hypertrophic breast and ERβ may be not obvious.
Key words:ERα；ERβ；hypertrophic breast
近几十年来，国内外在乳房肥大的病因学方面进行了很多有意义的研究，普遍认为，一方面可能与乳腺组织局部雌激素增多有关，另一方面可能是由于靶细胞对雌激素的敏感性增强[1]。而靶细胞敏感性的增强主要同乳房中的雌激素受体相关，孙家明[2]等人的研究表明肥大乳房乳腺组织中的雌激素受体较正常乳房增多。乳房中存在两种雌激素受体亚型，雌激素受体亚型α和β(ERα和ERβ)。乳房肥大的发生同这两种亚型有着怎样的关系，目前尚无人研究。本研究通过检测38例肥大乳房和17例正常体积乳房中ERα和ERβ的表达情况，以期进一步探讨雌激素受体亚型在乳房肥大发病机制中的作用及意义。
1 材料和方法
1.1 标本来源：实验组选自2005年9月～2010年10月在华中科技大学附属协和医院整形外科就诊的38例肥大乳房（单侧乳房体积大于600g）患者术中切除的乳房组织标本，患者年龄18～45岁，平均年龄28.63岁。乳房体积计算采用Sigurdson[3]等报道的方法。计算公式：乳房体积=33.5×PP＋37.7×FP－1305。对照组选自同期收治的乳房体积在200～350g的因单纯乳房下垂行乳房悬吊固定术（14例）和行性别转换单纯乳房切除术（3例）的患者。本组患者年龄21～44岁，平均年龄31.18岁，与实验组相比，经统计学分析无显著性差异（采用两样本t检验，P>0.05）。所有病例均回避月经期，于月经周期的第2～3周行手术，术后经病理诊断及病史回顾有以下情况者被排除：两个月内有服用雌激素类药物史；月经周期不规律；乳腺痛；乳头溢液；乳房触痛或硬结；有乳癌家族史或乳癌病史；乳房囊肿、积液或积乳；病理学检查存在非典型增生。
1.2主要试剂：鼠抗人ERα单克隆抗体，购自北京中杉金桥生物技术有限公司；鼠抗人ERβ单克隆抗体，购自北京中杉金桥生物技术有限公司；ChemMateTMEnVision两步法抗兔/鼠通用型免疫组化试剂盒（含有A液：ChemMateTMEnVision+/HRP，B液：DAB缓冲液，C液：DAB原液）。
1.3方法及结果判定：所有乳房标本经4�甲醛溶液固定后，石蜡包埋，连续4μm切片，每例切片至少3张，行HE染色及ERα和ERβ免疫组织化学染色。阅片采取双盲法，以光镜下细胞核内出现浅黄至棕黄色颗粒者为阳性细胞。每张切片随机选择5个高倍镜视野（×400）进行细胞计数，计算阳性细胞占总细胞数的百分比，取平均值。以阳性细胞表达率为判断标准：
2 结果
免疫组化染色结果：ERα多数仅见表达于细胞核，偶可见于胞浆，主要分布于乳腺上皮细胞，间质细胞及肌上皮细胞未见表达（图1、2）；ERβ多数可见细胞浆、细胞核同时表达，分布广泛，除乳腺上皮细胞外，还可见于间质细胞、内皮细胞、肌上皮细胞及淋巴细胞（图3、4）。ERα和ERβ在肥大乳房与正常体积乳房乳腺组织中的表达见表1和表2。
3 讨论
3.1 乳房肥大症的手术治疗目前已取得了很大的进展，但关于乳房肥大的病因学尚不十分明了，为此，人们进行了许多有意义的探索。国内孙家明[2]等采用葡聚糖包裹活性炭单点吸附法测定13例肥大乳房和13例小乳房的结果显示，肥大乳房组含量为（5.33±5.70）fmol/mg，小乳房组含量则为（1.16±0.86）fmol/mg，两组间差异比较具有统计学意义（P0.05）。故认为ERβ在乳房发育过程中可能只是起到基础抑制作用，同乳房肥大的发生不具有相关性，乳房肥大的发生主要应该是ERα的正性作用。过去有研究显示，乳腺增生病和乳腺纤维腺瘤中也有ER表达的升高，但是这些疾病的临床表现又完全不同于乳房肥大症，其发病机制同乳房肥大有着怎样的差别，目前尚无人研究，有待于我们在以后的实验中继续探讨。
3.4 雌激素受体亚型在肥大乳房组织中表达的研究不仅有助于肥大乳房病因的进一步深入和确定，而且也为肥大乳房的治疗提供了新思路。Baker[5]等采用雌激素受体拮抗剂三苯氧胺治疗乳房肥大术后复发取得了良好的效果，进一步确定两种亚型在乳房肥大发病过程中的作用，可以使我们的治疗更具针对性。虽然目前手术治疗效果尚可，但是手术的创伤及术后并发症所带来的痛苦仍是不可避免的，如果我们可以在基因水平治疗乳房肥大症，必能为患者带来更大的福音。
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[收稿日期]2011-10-16 [修回日期]2012-01-18
编辑/张惠娟