【摘要】 目的 研究ER、PR、C-erbB-2在甲状腺癌组织中的表达情况，探讨它们的相互关系及临床意义。方法 用免疫组化的方法检测ER、PR、C-erbB-2在甲状腺癌、甲状腺腺瘤和甲状腺正常组织中的表达，分析它们在不同病变组织中的表达状况以及与甲状腺癌临床病理参数的关系。结果 甲状腺癌组织中ER、PR、C-erbB-2的阳性表达率（58.5%、71.7%、41.5%）明显高于甲状腺腺瘤（36.0%、38.0%、20.0%）和甲状腺正常组织（4.0%、8.0%、4.0%）（P0.05）。结论 甲状腺癌、甲状腺瘤、甲状腺正常组织中均可检测到ER、PR、C-erbB-2的阳性表达，以甲状腺癌最高，提示女性激素可能是诱发甲状腺癌发生的重要因素；ER、PR、C-erbB-2在乳头状癌阳性率远高于其它分型，提示乳头状癌可能是女性激素依赖性肿瘤；在甲状腺癌中，ER、PR与C-erbB-2的表达呈负相关。联合检测ER、PR、C-erbB-2为进一步了解甲状腺癌的发生发展，判断甲状腺癌的恶性程度、预后及有无淋巴结转移有重要意义。
【关键词】 ER； PR； C-erbB-2； 甲状腺癌； 免疫组织化学
Significance of The Expression of ER，PR，C-erbB-2 in thyroid carcinoma TIAN Meng-zi*>/sup>，BI Yan-qing*>/sup>，ZHAO Xiao-hua.*>/sup>Dongying People"s Hospital，Dongying 257091 China
【Abstract】 Objective To study the expression of ER,PR andC-erbB-2 in thyroid carcinoma,to explore the relations among them and their clinical values.Methods Normal thyriod tissues,thyroid adenoma and thyroid carcinoma were evaluated for the expression of ER,PR and C-erbB-2 by immunohistochemistry,the levels of these proteins in tissues with different types of lesion and their correlation with clinicopathological parameters of thyroid carcinoma were analyzed.Results Compared with normal thyroid tissues and thyroid adenoma,the expression rates of ER,PR and C-erbB-2 of thyroid carcinoma increased obviously,there was significant difference between thyroid carcinoma and them（P0.05）.Conclusion The positive expression of ER,PR andC-erbB-2 were detected in normal thyroid tissues,thyroid adenoma and thyroid carcinoma.The expression in thyroid carcinioma was highest among them.Female sex hormone was probably a improtant agent induced the devolpment of thyroid carcinoma.It was close associated with the devolpment of thyroid carcinoma.The positive rates of ER,PR andC-erbB-2 in papillocarcinoma were higher than them in other thyroid carcinoma pathological types. Papillocarcinoma was probably a female sex hormone-dependent tumor.The expression of ER and PR were negative correlated withC-erbB-2 in thyroid carcinoma. Simultan- eously examing the expression of ER,PR andC-erbB-2 may have important effect on further investigation the mechanism of the devolpment of thyroid carcinoma,judgement the degree of m alignancy,prognosis and with or without lymph node metastasis in thyroid carcinoma.
【Key words】 Estrogen receptor; Progesterone receptor; C-erbB-2; Thyroid carcinoma; Immunohistochemistry
甲状腺癌是最常见的甲状腺恶性肿瘤，约占甲状腺原发性肿瘤的1/3，临床上较少见，但近年来呈上升趋势。其发病原因目前尚不清楚，除了一些公认的不确定因素,如可能与放射线和流行性甲状腺肿有关，某些髓样癌可有家族遗传性，部分未分化癌可能来自分化性乳头状腺癌和滤泡状腺癌等外，由于甲状腺癌发病性别差异较大，估计可能有性激素等因素的参与。甲状腺癌的发生、浸润转移机制尚不清楚，对甲状腺癌的生物学行为的研究也一直是人们关注的焦点。本研究通过检测ER、PR、C-erbB-2在甲状腺癌中的表达，探讨它们的临床意义，为探索甲状腺癌的发生发展的机制，判断分化程度、预后及有无淋巴结转移提供依据。
1 资料与方法
1.1 一般资料 选择潍坊医学院附属医院1995年～2005年手术切除并经病理证实的甲状腺癌存档标本53份，男10例，女43例，中位年龄40岁（20～75岁）。选择同期甲状腺腺瘤标本25份，另取腺瘤旁正常甲状腺组织25份。53例甲状腺癌患者术前均未做放、化疗，有完整临床资料。乳头状癌38例，滤泡状癌13例，未分化癌2例。
1.2 试验方法
1.2.1 所有组织均用10%甲醛液固定，常规石蜡包埋，4 μm厚连续切片，分别做HE和免疫组化染色
1.2.2 主要试剂 ER、PR、C-erbB-2基因、二步法染色试剂盒、DAB显色试剂盒、0.01 M PBS液、抗原修复液均购于北京中山生物技术有限公司。
1.2.3 采用二步法染色 根据试剂盒操作说明书中的要求和步骤制作标本，阳性对照采用对照片（购于北京中山试剂公司），以PBS代替一抗作阴性对照。
1.3 结果判定标准 根据着色深浅程度及阳性细胞数量（%），由两名经验丰富的病理科医师在400倍光镜下分别随机选择10个视野分析，并单独作出检验评估。阳性细胞必须是：（1）细胞结构清晰；（2）细胞定位性好；（3）着色明显高于背景。对表达强度进行半定量评估分级，即不着色为0分，浅黄色为1分，深黄色为2分，黄褐色为3分；计数阳性细胞百分率。将两者相乘，得免疫组化值H:H2>/sup>检验和Fisher精确概率法进行统计学分析。以P△>/sup>P*>/sup>P△>/sup>P*>/sup>P△>/sup>P*>/sup>P［1］，Molteni等［2］在4例PTC中发现有2例ER阳性。以后不断有报道在甲状腺癌中检测出ER和PR，考虑与甲状腺和卵巢同受TSH的调节，相互间有着必然的联系［3］。甲状腺癌的发病女多于男，男女之比约为1：（2～5），女性甲状腺癌组织中ER和PR的阳性率均高于男性，受体水平的不同是女性甲状腺癌发病高于男性的主要原因。甲状腺癌的发病年龄以20～40岁最多，年龄越小预后越好，高于40岁预后较差，死亡率达3.7%～27%；本组年龄大于40岁的甲状腺癌患者ER、PR阳性率明显高于年龄小于40岁组。可以认为年龄与女性激素的关系是影响甲状腺癌发病和预后的重要因素。PR是ER与E2复合物在癌细胞内合成的，被认为是肿瘤组织中雌激素活性标志。它的存在提示ER确实具有生物活性。本试验显示，甲状腺癌组织中的ER、PR含量远高与甲状腺腺瘤。因此，通过检测ER、PR有可能对早期发现甲状腺癌和鉴别甲状腺良恶性肿瘤提供帮助。某些肿瘤的生存有赖于一定的激素环境，称为激素依赖性肿瘤。肿瘤对激素依赖的物质基础在于肿瘤细胞是否含有对该激素特异性亲合的受体。激素依赖性肿瘤绝大多数发源于靶器官，有些肿瘤，虽非激素靶器官来源，也有一定程度的激素依赖性。ER及PR是存在于细胞中的一种对雌、孕激素有亲合力的蛋白质。在许多非靶器官的肿瘤中存在ER及PR，说明这些肿瘤和雌激素具有一定的关系。甲状腺不是雌、孕激素的靶器官，但本研究显示在甲状腺癌尤其是甲状腺乳头状癌中，含有存在较高的雌、孕激素受体，说明乳头状癌的发生发展与雌孕激素密切相关，甲状腺乳头状癌有可能是激素依赖性肿瘤。
3.2 C-erbB-2与甲状腺癌 C-erbB-2癌基因编码的p185蛋白与EGFR具有惊人的结构相似性，因此认为C-erbB-2癌基因编码某种未知生长因子受体［4］。虽然在肿瘤细胞的生长和分化中，C-erbB-2的功能仍然不十分清楚，但是因为这个基因编码生长因子受体，当其过度表达时，可能给予细胞生长优势并予以表达［5］。本研究显示C-erbB-2蛋白的表达绝大部分在甲状腺乳头状癌标本中，而滤泡状癌与未分化癌中表达极少，仅有2例表达，有文献报道认为C-erbB-2的表达是乳头状癌的一个特征性变化，本研究结果倾向于这个结论。甲状腺乳头状癌C-erbB-2的阳性表达率高于其他类型癌，C-erbB-2的过表达可能与乳头状癌易发生淋巴结转移的特点有内在联系，但由于滤泡状癌与未分化癌研究例数太少，在C-erbB-2的表达方面难以得出明确的结论，有待进一步研究加以证实。C-erbB-2不仅可以引起细胞的恶性转化，而且与多种肿瘤的预后密切相关。Wright等研究发现肿瘤中C-erbB-2蛋白表达仅次于淋巴结转移，是具有第二位预后意义的指标。本研究发现，甲状腺癌中C-erbB-2的表达与性别、年龄、肿瘤大小无相关性（P>0.05），而在有淋巴结转移的阳性表达率远远高于无淋巴结转移的阳性表达率（P△>/sup>P*>/sup>P