[摘要] 目的 建立桃红促孕合剂的质量标准。 方法 色谱条件Agilent-C18色谱柱，流动相：乙腈-0.1%磷酸溶液（14∶86），流速：1.0 mL/min，波长：230 nm。 结果 芍药苷在0.308 2～6.164 0 μg的范围内，有良好的线性关系，r = 0.999 9，平均回收率为98.79%，RSD为0.96%。 结论 建立了桃红促孕合剂的质量标准，该方法操作易行，稳定可靠，可用于桃红促孕合剂中芍药苷的含量测定及该制剂的质量控制。
[关键词] 桃红促孕合剂；芍药苷；高效液相色谱法
[中图分类号] R927.2 [文献标识码] A [文章编号] 1673-7210（2012）10（a）-0116-02
桃红促孕合剂是经批准生产的医院中药制剂[1]（豫药制字Z04140004），有补肾化瘀、理气和血之功效。经过多年的应用证明用于调节垂体卵巢功能，促成熟卵破裂排卵，治疗月经不调，无排卵性不孕症的功效显著。其处方由赤芍、熟地黄、赤芍、丹参、桃仁、红花等十味药组成，现行质量标准不能有效地控制药品质量。根据药效和处方确定赤芍为方中主要药味，而芍药苷是赤芍的有效成分之一，为了进一步提高该制剂标准，笔者采用HPLC法对处方中的芍药苷进行了含量测定。
1 仪器与试药
1.1 仪器
Agilent1260 HPLC；Agilent-C18（150 mm×4.6 mm，5 μm）色谱柱，AUW-220D电子天平（上海方瑞仪器厂）。
1.2 试药
桃红促孕合剂（商丘市柘城县人民医院提供，批号：110409、110520、110525）。芍药苷对照品（中国药品生物制品检定所提供，批号：110736-201035）。高效液相色谱所用试剂均为色谱纯，其他试剂均为分析纯。
2 方法与结果
2.1 色谱条件[2]
流动相：乙腈-0.1%磷酸溶液（14∶86），检测波长：230 nm，柱温：35℃，流速：1.0 mL/min，进样量：10 μL。理论塔板数按芍药苷峰计算应不低于2 000。
2.2 对照品溶液和供试品溶液的制备
2.2.1 对照品溶液的制备 精密称取芍药苷对照品适量，置量瓶中，加稀乙醇制成每毫升含30.82 μg的对照品溶液。
2.2.2 供试品溶液的制备 取供试品5支，混匀，精密量取5 mL，置于50 mL量瓶中，加稀乙醇35 mL，振摇提取，并加稀乙醇至刻度，滤过，取续滤液，即得供试品溶液。
2.3 线性关系考察
吸取对照品溶液（30.82 μg/mL）1.0、5.0、7.5、10.0、15.0、20.0 μL进样，芍药苷的保留时间为6.68 min，以芍药苷峰面积对进样量进行回归，芍药苷的回归曲线Y = 94.803X+2.865，r = 0.999 9，芍药苷在0.308 2～6.164 0 μg线性范围内线性关系良好。
2.4 阴性干扰试验
除赤芍外，其他各药味均正常投料制成阴性缺赤芍对照品，然后制成阴性供试品溶液。同法检测，在与芍药苷对照品色谱峰相应的位置上，供试品有相同保留时间的色谱峰，而阴性对照溶液在此位置上没有。见图1。
2.5 精密度考察
取同一供试品溶液（批号：110520）测定6次，测定峰面积，结果RSD = 0.84%。
2.6 重复性考察
精密称取（批号：110520）样品，制备供试品溶液6份，进样，测定。结果平均含量为1.032 mg/mL，RSD = 1.13%。
2.7 稳定性考察
取供试品溶液（批号：110520），进样（0、1、2、4、8、12 h），按上述色谱条件测定峰面积积分值。计算结果，RSD = 0.77%。
2.8 加样回收率考察
精密量取已知含量的样品6份（批号：110520），精密加入同一浓度（0.195 4 mg/mL）对照品，照上述方法制备，按上述色谱条件进样10 μL，测定，计算，平均回收率为98.79%，RSD为0.96%，结果见表1。
2.9 含量测定
按上述含量测定方法测定样品中芍药苷含量。结果见表2。
3 讨论
本研究以超声提取、振摇提取，回流提取为不同提取方法，同时处理30 min、1 h后，进行检测[3-6]，回流、超声和振摇30 min和1 h的提取效果基本相似，说明处理30 min时样品中的芍药苷已经被提取完全。而回流、超声和振摇30 min芍药苷含量分别为2.241、2.202、2.235 mg/mL，提取结果相近，考虑到实际操作过程的可操作性，本实验采取了振摇提取的提取方法。
桃红促孕合剂是临床实践证明疗效良好的医院制剂，但该药的质量控制方法仅有薄层鉴别，考虑到赤芍是桃红促孕合剂的主药，本实验用HPLC法对该制剂中芍药苷的含量进行测定，建立了该制剂的质量控制方法。该方法能够准确并快速地控制该制剂的质量，可用于桃红促孕合剂中芍药苷的含量测定。
[参考文献]
[1] 河南省医疗机构制剂标准.豫药制字：Z04140004[Z].
[2] 国家药典委员会.中国药典[S].一部.北京：中国医药科技出版社，2010：96.
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[4] 陈晓燕，李顺祥.HPLC法测定阿归养血糖浆中芍药苷含量[J].中医药导报，2009，15（3）：81-83.
[5] 刘洁.反相高效液相色谱法测定白芍提取物中芍药苷的含量[J].时珍国医国药，2010，21（9）：125.
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（收稿日期：2012-04-16 本文编辑：卫 轲）