摘 要 目的：探讨微柱凝胶配血技术的影响因素，以保证输血安全。方法：分别采用血液中心供血袋所连接的血辫中血样和患者未抗凝血样进行交叉配血，以研究抗凝剂对配血结果的影响；对不同厂家的微柱凝胶采用不同的孵育时间，以研究孵育时间对配血结果的影响；采用不同的离心机离心，以研究不同离心速度对配血结果的影响；采用与新生儿血型不同的供血进行交叉配血，以观察新生儿抗体的产生规律。结果：采用血辫中的标本，由于其未能与抗凝剂充分混合，假阳性率为86.67%(52/60)；患者血样不抗凝，配血假阳性结果为90.63%(87/96)；如果孵育时间由15分钟缩短至5分钟，阳性标本的漏检率为66.67%(8/12)；使用不配套的离心机配血结果假阳性率为23.81%(5/21)，假阴性率为25%(3/12)；有21.3%(32/150)的新生儿血清中抗体形成不完全，采用异型血交配，可呈现出“假配合”结果。结论：擅自改变离心力、孵育时间，会出现假阳性或假阴性配血结果。因血清中含有未完全消耗的纤维蛋白丝或红细胞凝集，使患者血样和供血者抗凝不完全或不抗凝，可出现假阳性配血结果或配血结果难以判断。21.3%的新生儿血型抗体产生不完全，说明保证其输血安全的前提是正确的血型鉴定，为新生儿输血不能仅仅依赖配血结果。�
关键词 微柱凝胶技术 交叉配血 影响因素�
doi:10.3969/j.issn.1007-614x.2012.06.250�
本科室最早用盐水配血法做交叉配血试验，但是只能检测出血清中的完全抗体；以后科室又用过酶法和抗人球法，最多是用聚凝胺配血法，直到2010年初取消聚凝胺配血法而采用抗人球蛋白微柱凝胶技术配血。由于微柱凝胶技术具有特异性强、灵敏度高、操作简便、标本用量少、结果可较长时间保存等优点［1］，虽然后几种方法也可检测出血清中的不完全抗体但也有被微柱凝胶技术配血取代的趋势。现经过一年多的反复试验，总结出了一定的经验和教训，总结报告如下。
资料与方法
试剂来源：西班牙戴安娜微柱凝胶8孔抗人球蛋白卡和血型卡、美强生ortho 6孔柱凝集卡。
样本来源：济宁市血液中心供血血样60份，本院产科留取的新生儿脐血血样150份，本科收集的12例不规则抗体阳性的标本和常规配血标本96份。
实验方法：①实验原理：把献血员的红细胞和患者的血清按一定比例加入微柱凝胶中与其混合，如果是阴性结果则不凝集的红细胞会完全沉到微柱底部。如患者血清中有完全抗体，经37℃孵育后，相对应的红细胞表面抗原会直接与完全抗体结合发生凝集，离心后这些凝块或颗粒也无法通过微柱凝胶筛即为阳性结果，其阳性的强弱一般根据微柱中凝集颗粒散布的程度、凝集颗粒的多少，以及微柱上面的凝块来判定。如果有不完全抗体经37℃孵育后，由于微柱凝胶中含有一定量的抗人球蛋白经其搭桥，不完全抗体致敏在献血员的红细胞上，便会形成大的凝集颗粒甚至成块状。②操作：按照试剂说明书严格操作，首先配制3%(v/v)红细胞悬液。做血型检查只需加10μl3%(v/v)红细胞悬液直接离心。如果配血需要先加10μl红细胞悬液，再加40μl血清，孵育15分钟后离心，最后观察结果。
结 果
供血血样对结果的影响：取60份供血血袋上的配血“辫子”配制成3%(v/v)的红细胞悬液配血，发现有些微柱中散落着细沙样的红色颗粒可致使结果出现假阳性，程度在(+-～++)，这样的占86.67%(52/60)。
患者血样不抗凝对配血结果的影响：采用患者血清进行配血中，有些微柱离心后柱上部有放射状的红色颗粒或有一条很粗的红线，从而使结果难以判断，这样的占90.63%(87/96)。
不同孵育时间对配血结果的影响：我们把不规则抗体阳性标本12例拿来孵育，5分钟孵育时间时出现阳性的只有4例，15分钟孵育时间则全为阳性，可见其漏检率为66.67%(8/12)。
不同离心机对配血结果的影响：我们用12份不规则抗体阳性的标本和21份阴性配血结果的标本做试验。用Ortho的卡而用戴安娜离心机，则不规则抗体阳性标本中有3份呈阴性(假阴性率为25%)，阴性标本全部呈阴性；用戴安娜配血卡而用Ortho离心机，12份不规则抗体阳性的标本则全部呈阳性，21份阴性标本中有5份出现假阳性，假阳性率为23.81%。
新生儿血型对配血结果的影响：我们用的新生儿脐血血样150例，有21.3%(32/150)正反定型不相符。其中20例我们拿来进行相反血型交叉配血(即A型配B型，B型配A型)，结果18例为阴性，其余2例弱阳性。
讨 论
微柱凝胶技术作为一种新型技术早晚会替代传统试管法而越来越普及，但如果要避免假阳性和假阴性的出现，保证安全输血，一定要正确使用此技术。如果患者血液处理不好会出现假阳性结果，如用血清样标，特别是急诊时因为赶时间，配血标本血浆纤维蛋白未完全析出就做试验常会出现假阳性。同样如果供血血细胞处理不好，血液未得到有效抗凝从而使血液中存在凝集颗粒，这种颗粒由于难以通过微柱也会出现假阳性，如血液中心在采血时由于操做不当“辫子”中的血没有与抗凝剂接触，后来我们先把血液的白细胞过滤后再配血，逐步解决了这一问题。
本实验室用戴安娜和Ortho产品作过互换试验，其中博唯优的离心机，采取两种离心速度，第一分钟采用1000r/分，后四分钟改为1500r/分，离心时间设设计为5分钟，戴安娜离心机离心速度是均一的，离心时间设计为10分钟［2］。所以不同的卡对离心力的要求不同，而不同厂家的微柱凝胶卡也不能混用，否则会影响配血结果，因此卡式配血必须使用其配套的离心机。另外在实验中，我们有时为了节省时间而缩短孵育时间最后会出现假阴性结果，因此为了输血安全不能单纯求快即使急诊实验也不行。
新生儿血型鉴定是一个需要特别重视的问题，正定型由于其红细胞上抗原性弱而容易漏检抗原，反定型由于抗体产生的滞后也容易出现错误，所以做新生儿血型鉴定时一定要认真仔细加强自己的责任心。我们科室就曾遇到血型错误的情况，儿科医生由于粗心将A型血患者写成了B型，我们在复查血型时发现血型错误，但用B型血进行交叉配血时结果呈现阴性，为了证实一下我们又为该A型新生儿找了5个B型血再进行交叉配血试验，结果5个全是阴性，为了进一步证实，我们用24例新生儿血清进行相反血型的交叉配血试验(即A、B型新生儿的血清分别用B、A型的红细胞交配)，结果正反相符的有20例，而其余4例结果呈阴性，经检测此4例新生儿的正反定型不符。后来我们做了150例新生儿反定型试验，结果有21%(32/150)的正反定型不符，与文献报道相符［3］。我们把其中20例标本进行相反血型交叉配血，结果18例出现阴性结果，其余2例为弱阳性。所以，正确的血型鉴定在新生儿的交叉配血试验中显得十分重要，如果血型错了即使配血试验通过也不能保证不出�问题�。
现在采用卡式配血虽然简单方便，但也不能过于依赖卡式而忽视了其影响因素，尤其是在新生儿的交叉配血试验中要特别注意。在配血试验中一定要胆大心细，加强责任心，排除任何干扰因素。
参考文献�
1 舒象武.应用微柱凝胶抗球蛋白技术进行交叉配血［J］.中国现代医学杂志,2003,13(13):116-118.省略parison of DATs using traditional tube aggluti-nation to gel coulumn affinity coulumn procedures［J］.Transfusion,2001,41:1258-1262.�
3 李勇,杨贵贞.人类红细胞血型学实用理论与实验技术［M〗］.北京:中国科学技术出版社,1999:251-276.�